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液相色譜氨基柱做反相使用時的原理介紹
點擊: 次 時間:2017-03-13 10:46
液相色譜儀氨基柱在含水量多的情況下是很不穩(wěn)定的,也不宜在強酸的環(huán)境下使用。緩沖液則先用水/乙腈清洗再用乙腈,氨基柱其本質(zhì)屬于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系統(tǒng)作為流動相以外,一般還采用乙腈-水作為流動相,但是要求乙腈的含量不得低于80%,含水過多的流動相對氨基柱有損害,一般盡量不要用含水過多流動相。建議用小流速的異丙醇沖洗過夜試試。
氨基柱是同時可以用于正相條件和反相條件的,這一點很多用戶都已經(jīng)知道。但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,對這一點的忽略可能會帶給使用者一些麻煩。NH2柱是在硅膠上鍵合一個5碳NH2;CN柱是在硅膠上鍵合一個5碳CN基;NH2.CN都為兩相柱。
對于新購買到的柱子,首先請注意打開分析測試說明書,了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與你將要使用的流動相極性不同不會互溶,請先用異丙醇過渡。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大,會導(dǎo)致柱壓很高,適當(dāng)調(diào)低流速即可。如果要使用的流動相中還含有緩沖鹽類,建議在用分析流動相之前,先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡,這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。反相條件下使用時,要特別注意控制PH值范圍,PH值越低越有發(fā)生水解的危險,流動相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險。所以,在使用后以及準(zhǔn)備長時間放置該柱時,必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。
(內(nèi)容來源化驗員之家)
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