苯甲酸和山梨酸是常用的食品防腐劑，如何測(cè)定酸菜中的苯甲酸和山梨酸呢？

一、儀器與試劑

1、儀器

高效液相色譜儀，超聲波清洗機(jī)，渦旋振蕩器，電子精密天平。

島津UX220H電子精密天平（220g/0.001g）

2、試劑

甲醇，乙酸銨，亞鐵氰化鉀，乙酸鋅，

苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品：CAS號(hào)：532-32-1，純度≥99.0%，

山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品：CAS號(hào)：590-00-1，純度≥99.0%；

苯甲酸、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1000μg/mL)；

苯甲酸、山梨酸混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別取10μL、50μL、100μL、200μL、500μL和1mL上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于10mL容量瓶中，用水定容至刻度線(xiàn)，配制成苯甲酸和山梨酸濃度均為1.00μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL和100μL/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

二、實(shí)驗(yàn)方法

1、取樣

準(zhǔn)確稱(chēng)取約2g(精確至0.001g)試樣于50mL具塞離心管中，加水約25mL渦旋混勻，于50℃水浴超聲處理20min，冷卻至室溫后加亞鐵氰化鉀溶液2mL和乙酸鋅溶液2mL，混勻，于8000r/min離心5min，將水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，于殘?jiān)屑铀?/span>20mL，渦旋混勻后超聲5min，于8000r/min離心5min，將水相轉(zhuǎn)移到同一50mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混勻。取適量上清液過(guò)0.22μm微孔濾膜，待液相色譜測(cè)定。

2、色譜參考條件

儀器: 高效液相色譜儀：二元高壓輸液泵、AS自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器；

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱，柱長(zhǎng)250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5μm；

流動(dòng)相：甲醇：乙酸銨溶液(20mmol/L)=5:95；

流速：1.0mL/min;

進(jìn)樣量：10μL；

柱溫：35℃；

檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm。

3、結(jié)果

使用高效液相色譜儀測(cè)定酸菜中的苯甲酸和山梨酸，將標(biāo)準(zhǔn)品連續(xù)進(jìn)樣7針，保留時(shí)間的RSD均小于0.2%，峰面積RSD均小于1%。因此可以滿(mǎn)足國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 5009.28-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定(第一法)》中苯甲酸和山梨酸含量測(cè)定的需求。