紫外可見分光光度計是一種應(yīng)用很廣的分析儀器，用來進行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等，應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個方面。

752S紫外可見分光光度計

一、定量分析

根據(jù)瑯伯-比爾定律，樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的，濃度越大，吸收值越高，所以分光光度計用的很多的還是定量分析。

定量分析的種類有很多，這里介紹常用的幾種定量分析方法：

A法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用很多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法，某一物質(zhì)在一定波長下ε值是一個常數(shù)，石英比色皿的光程是已知的，也是一個常數(shù)。因此，可用紫外可見分光光度計在λmax波長處，測定樣品溶液的吸光度值A。然后，根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb，則可求出該樣品溶液的含量或濃度。

B標(biāo)準(zhǔn)法：在選定的波長處，在相同的測試條件下，分別測試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣。然后，按C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)式求得樣品溶液的濃度或含量。

C標(biāo)準(zhǔn)曲線法：紫外可見分光光度計很常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液，再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長下，測試每個標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。之后，將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測得吸光度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量。

二、定性分析

定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì)。如果未知物的紫外吸收光譜的很大吸收峰波長λmax、很小吸收峰波長λmin、很大摩爾吸光系數(shù)εmax，以及吸收峰的數(shù)目、位置、拐點與標(biāo)準(zhǔn)光譜數(shù)據(jù)完全一致，就可以認為是同一種化合物。